1、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着划线的延伸，微生物数目逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、平板划线操作的注意事项：

①第一次划线、每次划线之前以及划线结束都需要灼烧接种环灭菌；

②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；

③划线时最后一区域不要与第一区域相连；

④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。

A、倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖，A错误；

B、为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌种，B错误；

C、好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养，C错误；

D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。

故选D。